高效实现细胞表面与胞内蛋白共染的流式细胞处理方法

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文章摘要:ag亚游官方网站,高层要动手吗,石师兄即便是真有神界之门。

在科研和临床诊断中,ag亚游官方网站:因流式细胞术可以对细胞内的生物标志物进行免疫染色和鉴定,其在鉴定细胞表型和功能中的应用已越来越重要。在细胞表型鉴定工作中,由于一些典型的膜分子定位在细胞质内,如未分化白细胞的CD3和CD22定位在细胞质中,因此除了对细胞表面分子的染色,细胞内生物分子的免疫染色是必不可少的。

为了使细胞内生物分子的免疫染色达到更好的效果,Nordic-MUbio推出了一款适用于流式细胞固定和通透的试剂盒FIX&PERM?试剂盒可以同时细胞表面和细胞内生物标志进行免疫染色整个流式细胞免疫染色时间缩短到1h以内细胞内生物分子鉴定提供了一种更好、更高效的选择。研究者使用FIX&PERM?试剂盒多种细胞表面CD分子细胞内Ki-67一种细胞内的增殖标志物进行双重染色通过流式分析增殖细胞(Ki-67阳性)数量疾病状态之间存在显著差异。

FIX&PERM?试剂盒由A液和B液两个试剂构成,其中A液够温和固定细胞,B液起到通透细胞膜的作用。FIX&PERM?试剂盒的独特配方有效降低背景把通透液和抗体一起加入细胞,还能抗体更高效地穿过细胞膜,与细胞内生物分子结合细胞质或核酶、癌蛋白、细胞因子、免疫球蛋白

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FIX&PERM? Cell Fixation and Permeabilization Kit

货号: GAS-002

规格:8 x 5ml

应用:Flow Cytometry

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FIX&PERM?优势特点:

  • 固定细胞更加温和,保细胞流式细胞仪中的分散性;
  • 同时细胞内和细胞表面的生物分子进行双重染色
  • 用时更短——-整个处理过程可在1h内完成处理后的细胞可以立即检测,也可以暂时保存后检测(不超过24h
  • 质控更严格——每个批次产品都要用标定血液样本检测,通过比较获得的白细胞分散性特征来确保不同批次试剂盒一致性和稳定性。
  • FIX&PERM?试剂盒还可搭配Nordic-MUbio细胞内生物标志物抗体,使流式检测效果更佳

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FIX&PERM?使用方法

  1. 50μl待测样品(如全血、骨髓或单核细胞悬液)于5ml离心管中;
  2. 加入100μl A液(固定液),室温孵育15min;
  3. 加入5ml PBS,300g离心5min;
  4. 移除上清,加入100μl B液(通透液和20μl流式抗体低速涡旋1-2s
  5. 室温孵育15min;
  6. 参照3步,用PBS再洗一遍细胞
  7. 移除上清,用鞘液重悬细胞做流式分析;如不能立即检测,可用0.5ml 1.0%甲醛重悬细胞,2-8避光保存并在24h内检测

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Nordi-MUbio热销单克隆流式抗体

Nordic-MUbio提供一些列小鼠抗人PE/FITC耦连单克隆流式抗体,与FIX&PERM?试剂盒配合使用效果更佳

抗原

克隆

IgG类型

抗体偶联物

规格

货号

CD3

UCHT1

IgG1

Purified

0.2 mg

GM-4011

FITC-labeled

100 tests

GM-4012

PE-labeled

100 tests

GM-4013

CD22

RFB4

IgG1

Purified

0.2 mg

GM-4051

FITC-labeled

100 tests

GM-4052

PE-labeled

100 tests

GM-4053

Lactoferrin

4C5

IgG1

Purified

0.2 mg

GM-4111

PE-labeled

100 tests

GM-4113

Myeloperoxidase

8E6

IgG1

Purified

0.2 mg

GM-4191

(MPO-C2)

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FITC-labeled

100 tests

GM-4192

?

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PE-labeled

100 tests

GM-4193

Lysozyme

LZ-2

IgG1

Purified

0.2 mg

GM-4131

FITC-labeled

100 tests

GM-4132

CD68

Ki-M7

IgG1

FITC-labeled

100 tests

GM-4152

IL-1 beta

FIB3

IgG1

FITC-labeled

100 tests

GM-4162

IFN-gamma

GZ4

IgG1

FITC-labeled

100 tests

GM-4172

Negative control

Vl-AP

IgG1

FITC-labeled

50 tests

GIC-201

PE-labeled

50 tests

-

Lysozyme

LZ-2

IgG1

FITC-labeled

50 tests

GIC-206

Lactoferrin

4C5

IgG1

PE-labeled

50 tests

-

Myeloperoxidase

8E6

IgG1

FITC-labeled

50 tests

GIC-212

Lactoferrin

4C5

IgG1

PE-labeled

50 tests

-

Myeloperoxidase

8E6

IgG1

FITC-labeled

50 tests

GIC-213

CD3

UCHT1

IgG1

PE-labeled

50 tests

-

Myeloperoxidase

8E6

IgG1

FITC-labeled

50 tests

GIC-214

CD22

RFB4

IgG1

PE-labeled

50 tests

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1? Flow cytrometric analysis of normal bone marrow (BM) after fixation and pemeabilization using GAS-002, followed by immunostaining for lactoferrin and MPO-C2.

图2? Immunostaining with Nordic-MUbio CD22-PE conjugate of undifferentiated leukemia cells of B-ALL type.

图3? Immunostaining with Nordic-MUbio CD3-PE conjugate of surface CD3-negative undifferentiated leukemia cells of T-ALL type.

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北京西美杰科技有限公司作为一站式生物试剂采购供应商,致力于整合全球优质资源,为生物研究领域客户提供丰富的产品与专业的服务。北京西美杰是Nordic-MUbio品牌中国区一级代理,为客户提供完善的技术支持与售后服务。如对上述产品感兴趣,欢迎随时拨打西美杰客服热线400-050-4006或登录西美杰官网768.236tyc.com查询订购。

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参考文献

Nies KPH, Kraaijvanger R, Lindelauf KHK, Drent RJMR, Rutten RMJ, Ramaekers FCS, Leers MPG. Determination of the proliferative fractions in differentiating hematopoietic cell lineages of normal bone marrow. Cytometry A. (2018) 93, 1097-1105 . doi: 10.1002/cyto.a.23564.

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